Анализ на инфекции

Оглавление: Виды анализов на инфекции Виды инфекций Скрытые инфекции ПЦР диагностика - анализ на инфекци Анализ инфекций методом ИФА

Справочная информация по телефону (8-3532) 43-07-32

Виды анализов на инфекции

Для диагностики на определение наличия у человека инфекции применяют такие методы:

1. Прямые (бакпосев, ПЦР-диагностика, ИФА-метод, определяющий антигены бактерий).
2. Непрямые (серология — ИФА, РА, РНГА, РПГА, РТГА).

Суть прямых методов заключается в обнаружении возбудителей инфекции, а также их антигенов. Чтобы определить бактерию или вирус, спровоцировавшие заболевание, проводят посев материала. Результатов такого метода приходится ждать около 10 дней, поэтому сегодня на помощь этой методике пришло ПРЦ-исследование, которое определяет антигены возбудителя (ДНК, РНК).

К прямым методам относится диагностика на выявление паразитов (яйца глистов и простейших). Самым распространенным методом непрямой диагностики является серология. Серологические анализы на инфекции используют для определения в биоматериале антител к возбудителю инфекционного заболевания. Работа антител заключается в защите организма от возбудителей, благодаря чему можно определить причину болезни. Серология изучает сыворотку крови.

Однако серологический анализ крови на инфекции не дает 100% чувствительности к заразителю, результаты такой диагностики оценивают с учетом клинических симптомов болезни. Для серологической диагностики берут слюну, сыворотку крови или фекалии. Серологический анализ крови помогает определить эффективность лечения, а также может установить рецидив болезни. С помощью серологии можно диагностировать амебиаз, лямблиоз, цистицеркоз, трихинеллез. Расшифровка серологии крови входит в компетенцию лаборатории.

Какие анализы сдают на инфекции?

Существуют разные виды анализов на инфекции. Анализы на вирусные инфекции. Основными методами лабораторной диагностики вирусной инфекции являются серологические анализы крови и определение вируса в культуре клеток.

Анализы крови бывают трех видов

1. Иммуноферментный анализ (ИФА) – основан на применении специфических вирусных белков, которые получены методом генной инженерии или выделены из инфицированных клеток. На каждый вид возбудителя вырабатываются определенные антитела, которые не могут связываться ни с каким другим возбудителем. В результате этого обеспечивается достаточно высокая специфичность данного исследования. Иммуноферментный анализ можно использовать как для качественной оценки, так и для количественной оценки исследуемого образца.

2. Анализ на титр противовирусных антител. Для определения антител к конкретному вирусу используют следующие реакции: - метод непрямой иммунофлюоресценции – взаимодействие сывороточных антител с антигенами вирусов в зараженных клетках; - реакции гемагглютинации и гемадсорбции – основаны на блокировании РНК-содержащих вирусов сывороточными антителами.

3. Иммуноблоттинг. С помощью данного метода можно выявить одновременно антитела к нескольким вирусам. Данный метод больше подходит для качественной оценки вирусов. Для проведения вируса в культуре клеток используют мазок из носоглотки, трахеи, бронхов, везикулярную жидкость, мочу, кал. Образец материала помещают на специальную питательную среду, где выращивают колонии микроорганизмов. В некоторых случаях вирус можно идентифицировать под световым микроскопом. Но чаще всего для точной идентификации применяют иммунофлюоресцентное окрашивание с использованием антител к данному вирусу. Сдать анализы на инфекции вирусной природы назначают пациентам при подозрении развития герпеса, цитомегаловируса, вируса папилломы человека, вирусных гепатитов, капельных вирусов (паротит, краснуха, корь).

Анализы на бактериальные инфекции.

Наиболее часто проводят анализы на следующие виды патогенных бактерий.

1. Стафилококк, стрептококк, энтерококк. Данные инфекции обычно поражают мочеполовые органы, дыхательные пути, мышцы, кости, суставы. Методом анализа чаще всего бывает бактериальный посев мазка на питательные среды.

2. Хламидии – внутриклеточные паразиты, которые вызывают инфекционные заболевания мочеполовой системы у женщин и мужчин. Методами анализа на выявление хламидий являются микроскопия соскобов со слизистых, определение возбудителя в культуре клеток, иммуноферментный анализ (ИФА).

3. Микоплазмоз – микроорганизмы, которые занимают промежуточное положение между бактериями, вирусами и простейшими. Развитие данной инфекции приводит к хроническому воспалению мочевых путей, дыхательной системы, половых органов и суставов. Наиболее информативным анализом на микоплазмоз является иммуноферментный анализ.

4. Уреаплазмоз – инфекция, которая способствует развитию пиелонефрита, простатита и уретрита у мужчин, воспалительных процессов матки и придатков у женщин.

 

Виды инфекций

В зависимости от типа возбудителя, подразделяются на:

• грибковые, причинами которых становятся аспергиллы – плесневые грибы, или кандиды – дрожжеподобные грибы;
• бактериальные, вызываемые различными бактериями – стрептококками, пневмококками, иногда кишечной, синегнойной, гемофильной палочкой, палочкой чумы и Пфейффера;
• вирусные, вызываемые различными вирусами.

Грибковые инфекции

Грибковые инфекции представляют собой поражение тканей организма одним или несколькими видами грибков. Грибковые инфекции могут быть поверхностными и локализованными (грибковые инфекции кожи) или затрагивать более глубокие ткани и приводить к серьезным инфекционным заболеваниям легких, крови (сепсис) или системным заболеваниям. Некоторые грибки относятся к условно-патогенным микроорганизмам, в то время как другие являются патогенными, вызывая заболевания вне зависимости от состояния иммунной системы.

Что такое грибки?

Грибки – одна из четырех основных групп микроорганизмов (бактерии, вирусы, паразиты и грибки). В природе грибки существуют в одной из двух форм: в виде одноклеточных дрожжей или плесени. Некоторые грибы диморфны, то есть переходят из одной формы в другую в зависимости от окружающей среды. Хотя дрожжи нельзя разглядеть невооруженным глазом, плесень можно увидеть: она представляет собой пятна с нечеткими очертаниями и образуется на перезрелых плодах или черством хлебе, а также в помещениях с высокой влажностью, например, в ванной или душевой. Известно более 50 000 видов грибов, но возбудителями заболеваний у человека могут быть менее 200 видов. Примерно 20–25 из них распространены и представляют реальную угрозу для здоровья.

Большинство грибковых инфекций возникают при контакте с источником грибов, например, их спорами на какой-нибудь поверхности или в воздухе, почве, или птичьем помете. Как правило, благоприятная среда для развития инфекции создается при подорванном иммунитете, когда защитные сила организма ослаблены. Заразиться грибковой инфекцией может любой человек может, но определенные группы населения подвергаются повышенному риску грибковых инфекций и их рецидивов. К факторам риска относятся:

• пересадка органов;
• наличие ВИЧ/СПИДа;
• прохождение химиотерапии или лечение иммунносупрессорными препаратами;
• сахарный диабет и заболевания легких.

Грибковые инфекции с участием грибов могут развиваться на поверхности и в складках кожи, в сгибах, а также на других участках тела с повышенной температурой и высокой влажностью. Также инфекции могут возникнуть в месте травмы, повреждения слизистых оболочек, придаточных пазух носа, и легких. Грибковые инфекции вызывают иммунную реакцию организма, и, как следствие, воспаление и повреждение тканей, и в некоторых случаях аллергическую реакцию.

ногие грибковые инфекции распространяются на небольшую площадь, например, между пальцами ног, в то время как другие могут распространяться по всей коже и проникать в более глубокие ткани. Прогрессирующие грибковые инфекции и инфекции, начинающиеся в легких, часто попадают в кровь и с кровотоком разносятся по всему организму. Некоторые грибковые инфекции исчезают без какого-либо вмешательства, но большинство из них требуют медицинской помощи и часто длительного лечения. Глубокие грибковые инфекции со временем ухудшаются и при отсутствии своевременного лечения могут привести к необратимым повреждениям, а в некоторых случаях и к летальному исходу. Некоторые грибковые инфекции легко передаются другим людям, однако есть и такие, которые не распространяются дальше инфицированного человека.

Грибковые инфекции классифицируют по части тела, которую они поражают, по глубине проникновения в организм, по возбудителю инфекции и по форме грибка. Некоторые микроорганизмы могут вызывать как поверхностные, так и системные инфекции.

Поверхностные грибковые инфекции кожи, ногтей и волос

Поверхностные грибковые инфекции могут быть вызваны как дрожжами, так и плесенью. На поверхности кожи существует множество микроорганизмов, образующих нормальную микрофлору. Нормальная микрофлора не вызывают заболеваний и не запускает иммунную реакцию. Однако если кожные покровы повреждены, а иммунная система ослаблена, любой микроорганизм, присутствующий в микрофлоре кожи, может вызвать кожную инфекцию. Если соотношение микроорганизмов в микрофлоре изменилось, то есть если бактерий стало меньше, а грибов – больше (иногда это происходит при использовании антибиотиков широкого спектра действия), может возникнуть грибковая инфекция, связанная с нарушением баланса микрофлоры.

Дрожжевые инфекции

Кандидоз – самая распространенная дрожжевая инфекция, что обусловлено в первую очередь чрезмерно быстрым ростом дрожжевых грибков Candida Albicans и других видов Candida, которые являются частью нормальной микрофлоры. В полости рта кандидоз вызывает покраснение и белый налет и называется «молочницей». У детей грибки Candida могут вызывать опрелости. У женщин кандидоз вызывает зуд гениталий и выделения из влагалища («молочница»). По статистике, почти 75% женщин хотя бы раз в жизни сталкивались с дрожжевой инфекцией. Кандидоз может также вызывать ряд других инфекций, в том числе инфекции ногтей, и может приобрести системный характер, особенно у людей с ослабленным иммунитетом.

Ногтевой грибок

Жара и влажность, принятие водных процедур в общественных местах очень часто являются причинами появления грибка, поражающего ногти. Его можно подхватить в spa-салонах, бассейнах, банях, при занятиях спортом, но к нему бывает и генетическая предрасположенность.

Распознать грибок ногтя не так сложно – пластина начинает отслаиваться, подниматься вверх, утолщаться, чернеть, желтеть, крошиться. Обычно страдают ногтевым грибком именно взрослые – детям это свойственно в меньшей степени. Подвержены грибку больше ногти на ногах, нежели на руках. И помимо симптомов, касающихся непосредственно ногтевой пластины, страдает кожа вокруг нее, появляется краснота, припухлость, болезненность. Это означает, что визит к специалисту откладывать не стоит.

Инфекция ротовой полости

Кандидозный стоматит – это грибковая инфекция, которая поражает слизистую оболочку ротовой полости. Грибок кандида всегда присутствует здесь, но дает о себе знать только в случае ослабления иммунитета, болезни, беременности или при приеме определенных медицинских препаратов.

Обычно болезненность появляется на внутренней стороне щек, на языке, деснах, миндалинах. Иногда инфекция из ротовой полости переносится на желудочно-кишечный тракт. Если она затрагивает пищевод, становится больно глотать. Но в серьезных случаях грибок затрагивает и желудок, и печень.

Лица с ВИЧ или онкологическими заболеваниями особенно сильно подвержены быстрому распространению грибка по организму, поэтому им особенно важно при малейших признаках поражения ротовой полости, что диагностируется в кабинете стоматолога, принять все меры по устранению инфекции.

Избежать грибковой инфекции ротовой полости можно соблюдая регулярно все гигиенические меры – чистка зубов дважды в день, использование зубной нити. Также при предрасположенности к заболеванию надо ограничить употребление вина и хлеба.

Грибковая инфекция передается младенцам при грудном вскармливании, если у матери имеются ранки в области соска.

Лечение грибковой инфекции

Любая грибковая инфекция требует немедленного лечения. Если человек достаточно здоров и обладает крепким иммунитетом, то выздоравливает он достаточно быстро. Если же иммунная система ослаблена, это займет гораздо больше времени. Последним показана регулярная проверка у стоматолога, которая не повредит также лицам с сахарным диабетом. Любая болезненность в ротовой полости должна стать причиной немедленного визита к врачу.

Для устранения инфекции часто используются противогрибковые кремы, которые надо наносить на пораженные участки. Также есть средства в капсулах, таблетках или в жидком виде, которые надо принимать до двух недель. Пораженную область нельзя расчесывать, и нужно постараться как можно меньше к ней прикасаться. Нельзя пользоваться чужими расческами, полотенцами, обувью, нужно чаще менять полотенца и постельное белье. При кожном грибке стоит подобрать вещи, которые свободно сидят на фигуре, не облегая и не натирая.

Если грибок поразил ногтевую пластину, то лучше приобрести специальный лак, который не имеет побочных эффектов. Две-три пары обуви в течение недели необходимо постоянно чередовать, и надевать ее только тогда, когда она чистая и сухая.

В случае повторения вспышки инфекции после выздоровления стоит проконсультироваться с врачом на предмет иного метода лечения. Важно не перепутать грибок с другими кожными поражениями, например, псориазом, который очень на него похож. Помимо лечения инфекции необходимо уделить должное внимание общему укреплению иммунитета.

Во избежание поражения кожи грибком рекомендуется добавлять в ванну масло чайного дерева, которое обладает хорошим обеззараживающим эффектом.

 

Бактериальные инфекции

К бактериальным инфекциям относится огромная группа заболеваний, причиной которых являются микроорганизмы – бактерии. Это небольшие одноклеточные микроорганизмы, имеющие прочную клеточную стенку для защиты от воздействия агрессивных факторов окружающей среды. Бактерии выделены в отдельное царство – прокариоты, так как не имеют ядра, их генетический материал расположен в цитоплазме клеток. Эти микроорганизмы являются самыми многочисленными и древними из всех живых существ, обитают практически везде (вода, воздух, почва, другие организмы).

Самым важным в развитии заболеваний, вызванных бактериальной инфекцией является выделение бактериями токсинов (ядов), которые обладают воспалительным действием, вызывают интоксикацию организма и повреждают внутренние органы:

• эндотоксины – выделятся после гибели бактерии и разрушения ее клетки (кишечные инфекции). Наиболее опасным является эндотоксин менингококка при менингококковой инфекции. В случае гибели значительного количества бактерий, выделившийся эндотоксин может привести к развитию инфекционно-токсического шока и привести к смерти.
• экзотоксины – яды, выделяемые живыми бактериями в процессе их жизнедеятельности (дифтерия).

Принципы диагностики бактериальных инфекций

Основным методом в диагностики бактериальных инфекций является бактериологическое исследование. При этом от больного берется материал, содержащий бактерии, и засевается на специальные питательные среды. После роста колоний на питательных средах (около 48 часов), бактерии идентифицируют. Огромным плюсом данного метода является возможность проводить исследование чувствительности выделенной бактерии к антибиотикам, для назначения рационального лечения. Также используются:

• микроскопическое исследование материала – позволяет поставить ориентировочный диагноз при выявлении бактерий с помощью микроскопа.
• серологическое исследование – определяется наличие антител в крови к определенным бактериям, увеличение титра антител свидетельствует о наличии в организме бактерий.

Принципы лечения бактериальных инфекций

Лечение бактериальных инфекций, как и любого другого заболевания, является комплексным и включает:

• этиотропная терапия – лечение, направленное на уничтожение причины заболевания – бактерии. Для этого используется арсенал антибиотиков. На данный момент есть несколько групп антибиотиков, но самым важным является их разделение на бактерицидные антибиотики (убивают бактерии) и бактериостатические (подавляют рост и размножение бактериальных клеток). Это очень важно знать, особенно в случае менингококковой инфекции назначение бактерицидных антибиотиков приведет к массовой гибели менингококков и выходу эндотоксинов в кровь.
• патогенетическая терапия – направлена на выведение из организма бактериальных токсинов, которые накапливаются в процессе инфекционного заболевания (дезинтоксикация). Также проводится лечение, направленное на восстановление поврежденных органов.
• симптоматическая терапия – необходима для облегчения состояния человека при бактериальной инфекции и снижения выраженности симптомов.

В нынешнее время, благодаря антибиотикам удается излечивать большинство бактериальных инфекций, однако стоит помнить, что неправильный прием антибиотиков может привести к развитию у бактерий резистентности (нечувствительности) и даже зависимости от антибиотиков.

Вирусная инфекция

Вирусные инфекции – большая группа заболеваний, причиной которых служит вирус. Вирусы представляют собой переходную форму между живой и неживой материей. Так у вирусов есть генетический материал, однако собственной клетки нет. Поэтому вирус является только внутриклеточным паразитом. При заражении ген вируса встраивается в геном клетки-хозяина, и клетка «вынуждена» использовать свои ресурсы для сборки новых вирусных частиц.

В зависимости от генетического материала все вирусы делятся:

• ДНК-содержащие вирусы – геном состоит из односпиральной или двуспиральной ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота), к ним относятся аденовирус (простудные заболевания, аденовирусная инфекция), герпесвирус (герпес, опоясывающий лишай, ветряная оспа), папилломавирус (папилломатоз человека), гепаднавирус (вирусный гепатит В).
• РНК-содержащие вирусы – только у некоторых видов вирусов генетическим материалом может быть РНК (больше нигде в природе), это: ортомиксовирус (грипп), флавивирус (вирусный гепатит С), ретровирус (ВИЧ СПИД), полиовирус (полиомиелит).

Диагностика вирусных инфекций

В первую очередь клинические симптомы позволяют заподозрить ту или иную вирусную инфекцию. Для верификации вируса в лабораториях используют несколько методов диагностики:

• вирусологический метод – вирусом из материала от пациента заражают культуру клеток куриного эмбриона, со следующим выделением и идентификацией вируса, используется редко, так метод трудоемкий и дорогой.
• серологический метод – основан на определении титра антител в крови человека к определенному вирусу. На сегодняшний день распространенный и востребованный метод, так как позволяет определить находится вирус в латентном состоянии (в крови есть только Ig G) или в стадии репликации (Ig M). Это позволяет правильно и рационально назначать противовирусные препараты.

Лечение вирусных инфекций

Сложность лечения заключается в том, что вирусы являются внутриклеточными паразитами. Значимая роль в элиминации (полного уничтожения) вируса в организме принадлежит клеточному звену иммунитета. В зависимости от точки приложения лечение подразделяется:

• этиотропная терапия – направлена на уничтожение вируса внутри клеток. Используются препараты, которые блокируют репликацию вируса (ацикловир, лаферобион, циклоферон, арбидол, амиксин). Эффективность может быть только в случае репликации вируса, если же вирус находится в латентном состоянии в геноме клетки, то действие этих препаратов отсутствует. К примеру арбидол при гриппе эффективен в течении 3-х дней от начала заболевания (период активной репликации вируса).
• иммуномодулирующая терапия – используется с целью усилить иммунитет организма, для уничтожения вируса вместе с зараженными клетками (эхинацея, элеутерококк).

Профилактика вирусных инфекций

Профилактика вирусных инфекций бывает специфичной и неспецифичной.

• специфическая профилактика – проводится вакцинация с целью развития иммунитета против определенного вируса (вакцинация от вирусного гепатита В в календаре прививок, вакцинация против гриппа в эпидсезон).
• неспецифическая профилактика – направлена на усиление иммунитета в целом, а не только против определенного вируса (режим труда и отдыха, правильное питание, растительные препараты).

Учитывая особенности патогенеза и лечения вирусных инфекций, на первый план выходит их профилактика, особенно при ВИЧ СПИД и вирусных гепатитах.

Клиническая картина различных видов вирусной инфекции

Различная структура вирусов, особенности поражения различных систем органов, степень их агрессии по отношению к человеческому организму обуславливают различную клиническую симптоматику и тяжесть течения вирусной болезни.

Одной из самых распространенных на сегодняшний день группой вирусных инфекций является группа острых респираторных инфекций (ОРВИ). В нее входят грипп, парагрипп, риновирус, аденовирус, реовирус, коронавирус и некоторое другие. Данные вирусы преимущественно поражают, так как обладают тропностью, к эпителию дыхательных путей. Типичные симптомы этой группы вирусных инфекций: преимущественно сухой кашель, ощущение покалывания в горле, заложенность носа и серозно-гнойные выделения из носовых ходов, возможны также инъекция сосудов склер и боль в глазных яблоках. Как правило, симптомы поражения дыхательного тракта сочетаются с общими признаками (синдром интоксикации): повышение температуры, слабость, ноющая боль в мышцах и суставах. Исход большинства острых респираторных инфекций вирусной этиологии благоприятный. Возможно развитие осложнений, таких как отек легких или мозга, пневмония, синусит, при наличии тяжелой хронической патологии, отсутствии необходимого своевременного лечения болезни.

Не менее обширная группа так называемых детских воздушно-капельных инфекций, к которым относят корь, краснуху, ветряную оспу, эпидемический паротит. Практически все эти вирусы поражают преимущественно детей; при заражении взрослого человека наблюдается значительно более тяжелое течение болезни, высок риск развития всевозможных осложнений.

Корь характеризуется появлением катаральных явлений (сухой кашель, конъюнктивит насморк), специфических пятен на слизистой щеки (пятна Филатова-Бельского-Коплика), а также типичной сыпи. Сыпь при кори обусловлена непосредственным действием вируса кори на кожный эпителий, возникает поэтапно (на 4-5 день болезни на лице, на следующий день – на туловище, затем по всему телу), элементы крупных размеров, красного цвета. В дальнейшем сыпь бледнеет, возможна пигментация. Опасность для человека представляется не столько сама корь, сколько ее осложнения: менингит (воспаление мозговых оболочек) и менингоэнцефалит (поражение собственно вещества головного мозга).

Краснуха в типичных случаях проявляется развитием умеренного катарального синдрома, увеличением затылочных лимфатических узлов и появлением сыпи мелкой пятнисто-папулезной сыпи. Краснуха представляет особую опасность для женщин в период беременности, так как вирус краснухи обладает тератогенным эффектом. Чем меньше срок гестации, тем более тяжелые поражения плода развиваются. У будущего ребенка наблюдаются тяжелые пороки развития сердца и сосудов, нервной системы, а также органа зрения. Если данная вирусная инфекция возникла в 1ом триместре, женщине рекомендуется искусственное прерывание беременности.

Герпетическая инфекция поражает большую часть населения земного шара. Клинические проявления данной вирусной инфекции определяются типом вируса и исходным состоянием иммунной системы человека. Вирусы герпеса 1ого и 2ого типа поражают кожные покровы лица в виде пузырьковых высыпаний, сопровождающихся зудом и жжением. Вирус герпеса 3его типа при первичной атаке человеческого орагнизма вызывает ветряную оспу (пузырьковые высыпания по всему телу в сочетании с общей интоксикации), при повторном – опоясывающий герпес (пузырьковая сыпь вдоль межреберных промежутков, сопровождающаяся сильной болью). 4ый тип вирус вызывает так называемый инфекционный мононуклеоз. Эта вирусная болезнь характеризуется увеличением всех групп лимфатических узлов, селезенки и печени, возникновением ангины, редко – сыпью и желтухой. Герпетическая инфекция также представляет серьезную опасность для женщины в интересном положении: возможна пенетрация вируса через плаценту и формирование различных по степени тяжести пороков развития у плода.

Вирусные гепатиты – группа острых и хронических заболеваний, характеризующихся, в основном, поражением печени. Вирусы гепатитов (гепатит А и Е) могут передаваться фекально-оральным путем: при употреблении контаминированной пищи, воды, непосредственном контакте с больным человеком. Гепатит В, С, D передается гемоконтактным путем: при переливании зараженной крови, использовании недостаточно обработанного медицинского инструментария, при проведении педикюра, маникюра, татуажа и пирсинга. Любой вирусный гепатит проявляется желтухой кожи и слизистых, общей интоксикацией, обесцвечиванием кала и потемнением мочи, в основе которых - глубокое нарушение всех функций печеной ткани. В тяжелых случаях эти вирусы могут привести к острой печеночной недостаточности и смерти больного. Ряд вирусов (В, С, D) может привести к формированию хронической формы болезни, в последствии – цирроза печении и раковой трансформации ткани.

Некоторые виды вирусов могут вызвать преимущественное поражение нервной системы (центральной и периферической). К ним относятся: энтеровирусы, вирус полиомиелита, клещевого и японского энцефалита. Энтеровирусная инфекция характеризуется полиморфной клинической симптоматикой, кроме явлений менингита может наблюдаться сыпь, ангина, диспептические явления. Исход болезни благоприятный.

Полиомиелит – одно из самых тяжелых вирусных заболеваний. Типичные клинические признаки: возникновение парезов и параличей конечностей, реже – дыхательной мускулатуры при сохранении чувствительной сферы в результате воспалительных и дистрофических процессов спинного мозга. В настоящее время эффективные медикаментозные средства лечения полиомиелита не разработаны. Очень часто двигательные нарушения остаются у пациента на всю последующую жизнь.

Клещевой (русский) и японский энцефалиты – природно-очаговые вирусные инфекции, встречающиеся преимущественно в определенной географической зоне. Характеризуются поражением непосредственно головного мозга. В результате наблюдаются нарушения сознания (вплоть до мозговой комы), общие судороги, парезы и параличи конечностей и туловища. Достоверно надежные и эффективные средства лечения не разработаны, высокий процент летальных исходов.

Скрытые инфекции

Сегодня наиболее часто встречающимися скрытыми инфекциями считаются хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз, герпес, цитомегаловирус. Определить эти заболевания без специальной диагностики практически невозможно - к врачу зачастую обращаются при обострении заболеваний, а то и вовсе не обращаются.

Коварство скрытых инфекций состоит в том, что они дают множество осложнений, одно из которых - бесплодие. Скрытые инфекции трудно поддаются лечению даже с помощью антибиотиков, а из-за отсутствия симптомов больной, выздоровев, может заразиться снова и совершенно об этом не знать.

Проявления скрытых инфекций

Вызванные скрытыми инфекциями болезни мочеполовых органов и органов малого таза у женщин часто не имеют выраженных проявлений. Только при обострении болезни они сопровождаются слизистыми, а при присоединении вторичной инфекции - слизисто-гнойными выделениями, гиперемией, рыхлостью, отеком слизистой влагалища и шейки матки, а также эрозиями ее слизистой. Инфекции же практически всегда паразитируют и размножаются в зоне эрозии, т.к. эта площадка представляет собой идеальное питание для любой микрофлоры - бактерий и вирусов. Распространение инфекции на органы малого таза вызывает воспаление маточных труб и яичников (сальпингоофорит), которое при обострении болезни сопровождается периодическими ноющими болями внизу живота или в области крестца. Возможна также инфекция мочевыводящих путей, особенно при уреаплазменной инфекции. В свою очередь хроническое воспаление матки и придатков формирует неполноценность слизистой оболочки матки и образование спаек внутри матки и труб, что ведет к бесплодию.

У беременных скрытые мочеполовые инфекции способны проникать в плаценту, ткани последа, а также в организм плода, поражать их, неблагоприятно влиять на течение и исход беременности (вызывают выкидыши, преждевременные роды и др.) и на здоровье новорожденных.

Диагностика скрытых инфекций

Скрытые инфекции очень опасны для человека еще и тем, что обнаружить их можно только при обследовании у врача и сдаче специального анализа (ДНК, ПЦР). ДНК - диагностика является в настоящее время самым достоверным анализом на скрытые инфекции. Генно-молекулярный метод основан на выделении содержащих в биологических особях (в данном случае - микробах) строго специфичных для каждого их вида генных структур - ДНК и (или) РНК. Метод отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Анализ крови сдается, как правило, при подозрении заражения сифилисом, ВИЧ (СПИД), гепатитами В и С. Специальные (высокодифференцированные) анализы на скрытые инфекции бывают необходимы в некоторых случаях. Об этих методах диагностики на скрытые половые инфекции можно проконсультироваться с врачом.

 

ПЦР диагностика - анализ на инфекции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того, как заболевание может себя проявить.

Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в 1983 году разработал Кэри Мюллис (США), за что в 1993 году он удостоен Нобелевской премии в области химии.

ПЦР анализ стал для большинства инфекций своеобразным «золотым стандартом». Большинство специалистов сталкиваются с ним практически ежедневно и не представляют без него постановку окончательного диагноза. ПЦР нередко становится единственной реакцией для выявления активных стадий заболевания в те моменты, когда не срабатывают другие бактериологические, вирусологические, иммунологические методы диагностики.

Преимущества ПЦР-диагностики в современной медицине:

• Непосредственное выявление присутствия возбудителя (а именно, специфического участка ДНК или РНК возбудителя) в исследуемом образце.
• Высокая специфичность позволяет определять уникальный участок ДНК или РНК, характерный для конкретного возбудителя, что исключает возможность ложных реакций.
• Высокая чувствительность метода ПЦР позволяет обнаружить даже единичные клетки возбудителей (вирусов, бактерий). Чувствительность ПЦР-анализа составляет 10-1000 клеток в исследуемом образце (к примеру, чувствительность иммунологических и микроскопических тестов - всего 103-105 клеток).
• Разработка универсальной методики ПЦР для обнаружения различных возбудителей. Объектом для исследования методом ПЦР служит генетический материал (ДНК, РНК) возбудителя. Методика позволяет выявлять несколько возбудителей из одной биологической пробы.
• Достаточно быстрое получение результата анализа. Полное исследование проводится за 4-4,5 часа, реже – несколько дольше.
• Возможность обнаружения патогенов до возникновения симптомов заболевания (доклиническая диагностика) и после прошедшей болезни (ретроспективная диагностика). Примером доклинической диагностики будет обследование в инкубационный период (с момента заражения до возникновения жалоб больного), а также латентная инфекция (когда симптомов нет совсем, а есть только лабораторные данные – ПЦР, к примеру). Одним из важных моментов ПЦР-диагностики является проведение ПЦР в архивном материале или биологических остатках, что важно для идентификации личности или отцовства.

В настоящее время ПЦР-диагностика подвергается существенному развитию. Происходит совершенствование самого метода, вновь и вновь появляются новые разновидности ПЦР, на медицинский рынок поступают новые тест-системы для данной реакции. Благодаря этому стоимость ПЦР-исследований с каждым годом становится доступнее для широкого круга пациентов.

На чем основан метод ПЦР

Основой полимеразно-цепной реакции является многократное удвоение (амплификация) определённого участка ДНК или РНК при помощи ферментов в лабораторных условиях. В результате образуется то количество ДНК или РНК, достаточное для визуального анализа. В ходе исследования копируется только тот участок, который подходит под заданные условия, и только в ситуации присутствия его в исследуемой пробе.

Например, материал для исследования, в котором предполагается наличие фрагментов ДНК или РНК возбудителя (слюна, кровь, моча, выделения из половых органов), помещается в специальный реактор (амплификатор). Далее к нему добавляются специфические ферменты, которые связываются с ДНК или РНК патогена, и происходит синтез ее копии. Это копирование идет в несколько этапов по типу «цепной реакции», и в конечном итоге из одной копии генетического материала могут образоваться сотни и тысячи копий. Затем идет анализ и сравнение результата с имеющейся базой данных о строении различных возбудителей. Посредством ПЦР можно не только выявить тип возбудителя, но и выдать количественный результат анализа, то есть как много возбудителей в организме человека.

Метод ПЦР в настоящее время расширяет круг возможностей проводимых исследований: введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК, и получил широкое распространение в медицине, к примеру, для установления отцовства, появление новых генов и прочее.

Какие инфекции можно выявить с помощью ПЦР-диагностики

1) ВИЧ-инфекция (можно выявить вирус иммунодефицита человека ВИЧ-1)
2) Вирусные гепатиты А, В, С, G ( РНК-HAV, ДНК-HBV, РНК-HCV, РНК-HGV)
3) Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр -ВЭБ)
4) Цитомегаловирусная инфекция (ДНК-CMV)
5) Герпетическая инфекция (ДНК- вируса простого герпеса ВПГ 1 и 2 типа)
6) ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) – уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз,
7) Туберкулез (микобактерия туберкулеза)
8) Онкогенные вирусы – папилломавирусная инфекция (вирус папилломы человека (в том числе его онкогенные виды 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, и 59)
9) Боррелиоз, клещевой энцефалит
10) Листериоз
11) Кандидоз (грибы рода Candida)
12) Хеликобактерная инфекция (Helicobacter pylori)
и другие

Учитывая спектр возбудителей, ПЦР-диагностика активно используется в гинекологической, урологической практике, практике инфекциониста, в пульмонологии, фтизиатрии, гастроэнтерологии, гематологии, онкологии и других.

Материал для исследования и правила его забора

Материалом для ПЦР-исследования, в котором можно выявить чужеродную ДНК бактерии или ДНК или РНК вируса могут служить различные биологические среды и жидкости человека: слизи, моче, крови, мокроте, соскобе эпителиальных клеток, тканях плаценты, крови, соке простаты, околоплодные воды, плевральная жидкость.

При обследовании на инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), у мужчин и женщин забираются выделения из половых органов, мазок или соскоб из шейки матки, мазок или соскоб из уретры (мочеиспускательного канала), моча.

При обследовании на инфекции (герпетические инфекции, ЦМВИ, мононуклеоз, токсоплазмоз, гепатиты В, С, ВИЧ-инфекция) на ПЦР забирают кровь.

Для диагностики инфекционного мононуклеоза, ЦМВИ, герпетической инфекции забирается мазок из зева, для обследования на ЦМВИ – моча. Нередко для обследования на поражение нервной системы при ряде исследований забирается спинномозговая жидкость.

В пульмонологии материалом служит мокрота, плевральная жидкость.

При обследовании на внутриутробные инфекции – околоплодные воды, ткани плаценты.

Подготовка к сдаче материала и проведению ПЦР-диагностики

Практически все пациенты, которым проводится ПЦР-диагностика, вправе рассчитывать на достоверный, точный и быстрый результат, зависящий в большой степени от возможности лаборатории, профессионализма врача-лаборанта. Вместе с тем, многие не задумываются, что эта самая достоверность во многом зависит и от нас самих, а именно от рекомендаций лечащего доктора, образа жизни и правильности забора материала. При заборе материала требуются условия, исключающие контаминацию (загрязнение) материала и, соответственно, ставящие под сомнение объективность анализа.

Правильная подготовка к сдаче материала не представляет особых сложностей. Существуют следующие рекомендации врачей для пациентов: 

 1) не жить половой жизнью за сутки до сдачи материала;
2) кровь для исследования сдается утром натощак (не есть, не пить);
3) при сдаче мочи собирается первая утренняя порция в чистый стерильный контейнер.

Сроки готовности ПЦР-анализа

Окончательный результат готов через 1,5-2х суток после сдачи материала. В некоторых случаях результат готов в первый же день.

Расшифровка результатов ПЦР

Отрицательный результат ПЦР указывает на то, что в исследуемом материале на момент его сдачи не обнаружено никаких следов инфекционных агентов. Большинство случаев показывает отсутствие инфекции, которую пытались найти в исследуемой пробе.

Положительный результат ПЦР указывает на выявление следов инфекции в исследуемой биологической пробе. С большой точностью положительный результат указывает на наличие инфекции в данный момент времени.

Существуют ситуации, когда ПЦР оказывается положительной, а об активной инфекции говорить нельзя – это так называемое «здоровое носительство» без клинических симптомов болезни, которое не требует лечения, но требует динамического наблюдения у врача.  Наблюдается чаще при ряде вирусных инфекций (ВПЧ, ЦМВИ, ВЭБ-инфекция, герпетическая инфекция и другие) в таких материалах как слюна, соскоб цервикального канала, уретры, то есть из местного очага. Однако нельзя забывать, что передача инфекции от носителей здоровым людям возможна, как и возможен  переход в хроническую форму болезни с активацией процесса. Если же ПЦР положительна в крови, то это уже не носительство и требует специфического лечения.

Количественный результат ПЦР оценивается только врачом индивидуально для той или иной инфекции отдельно и не имеет общих градаций. На основании количественного результата ПЦР врач может установить степень активности инфекции и выставить стадию болезни, что безусловно отразится на курсе и дозах назначенных лекарственных средств.

Насколько точна ПЦР-диагностика?

Для ПЦР анализа существует 3 определения:

1. Точность (с высокой долей вероятности возможно выявление или отсутствие инфекции).
2. Специфичность (точность выявления конкретной инфекции).
3. Чувствительность (даже при низком содержании генетического материала возбудителей в исследуемом образце инфекция будет обнаружена).

Полимеразно-цепная реакция практически не выдает ложноположительных результатов (то есть не бывает положительных проб там, где инфекция отсутствует). Ложноотрицательные результаты наблюдаются редко (чаще это связано с отсутствием активной инфекции у человека в данный момент). Например, латентная инфекция, хроническая инфекция вне активности.

Какие инфекции можно обнаружить методом ПЦР?

 Способна обнаружить целый ряд патогенных микроорганизмов ПЦР-диагностика инфекций. Расшифровка результатов сводится к обнаружению возбудителя и определению его вида. С помощью полимеразной цепной реакции диагностируют различные заболевания человека: от передающихся половым путем до бессимптомных, так называемых скрытых инфекций. С помощью ПЦР находят:

 вирус гепатита (А, В, С);

уреплазму уреалитикум;

 уреплазму парвум;

 хламидию трахоматис;

кандиду;

микоплазму хоминис;

микоплазму гениталиум;

гарганеллу вагиналис;

трихомоназ;

 микобактерию туберкулеза;

вирус герпеса простого 1 и 2 типа;

вирус папилломы;

вирус Эпшетейна-Барра;

хеликобактер пилори;

вирус иммунодефицита.

Вышеперечисленные микроорганизмы вызывают такие заболевания, как гепатит, туберкулез, ИППП и СПИД. ПЦР-диагностика инфекций проводится в виде качественного (то есть определяют наличие или отсутствие возбудителя) и количественного анализа (высчитывают количество микроба в организме – такой подход необходим, например, при диагностике ВИЧ-инфекций и гепатита).

Анализ инфекций методом ИФА

Иммуноферментный анализ – современное лабораторное исследование, в ходе которого ведется поиск специфических антител в крови либо антигенов к конкретным заболеваниям с целью выявления не только этиологии, но и стадии болезни. Результаты ИФА могут выдаваться качественно и количественно.

В настоящее время ИФА применяется в следующих ситуациях:

1) Поиск специфических антител к любому инфекционному заболеванию;
2) поиск антигенов каких-либо заболеваний (инфекционных, венерологических);
3) исследование гормонального статуса пациента;
4) обследование на онкомаркеры;
5) обследование на предмет наличия аутоиммунных заболеваний.

Преимущества метода ИФА:

1) Высокая специфичность и чувствительность метода ИФА (более 90%).
2) Возможность определения заболевания и отслеживания динамики процесса, то есть сравнивание количества антител в разных временных промежутках.
3) Доступность ИФА-диагностики в любом медицинском учреждении.

Относительный недостаток:

1) Выявление иммунного ответа (антител), но не самого возбудителя.

На чем основан метод ИФА.

Выделяют несколько разновидностей ИФА (прямой, непрямой, метод блокирования, конкурентный), однако на практике чаще всего используется гетерогенный твердофазный иммунный анализ или ELISA (enzyme linked immunosorbent assay)

Основу иммуноферментного анализа составляет иммунная реакция антигена и антитела с образованием иммунного комплекса: антиген-антитело, в результате которого происходит изменение ферментативной активности специфических меток на поверхности антител.

Простым языком этот процесс можно разделить на несколько этапов:

1) На поверхности лунок планшета доктора, проводящего обследование, находится очищенный антиген определенного возбудителя. При добавлении биологического материала (сыворотки крови) пациента происходит специфическая реакция между этим антигеном и искомым антителом (иммуноглобулином). Это соединение будет выступать «особым антигеном» в следующем этапе.

2) На данном этапе идет образование ИК (иммунных комплексов) - реакция между «особым антигеном» и конъюгатом (это иммуноглобулин, меченый ферментом пероксидазой). Добавляется особый хромоген. Результатом такой ферментативной реакции является образование окрашенного вещества в лунке планшета, интенсивность окраски которого зависит от количества содержащихся в материале пациента иммуноглобулинов (антител).

3) Далее происходит оценка результата: фотометрирование с помощью многоканального спектрофотометра, сравнение оптической плотности исследуемого материала с оптической плотностью контрольных проб, математическая обработка результатов. Количество антител у пациента напрямую зависит от высоты оптической плотности данной лунки.

Обычно на практике используют 96 луночные планшеты.

При измерении оптической плотности (ОП) исследуемой жидкости подсчитывается количество (или концентрация) антител в определенной единице объема. Затем результат сравнивается с контрольным образцом.

Нужно помнить:для каждой тест-системы разрабатываются индивидуальные показатели для учета результатов, показатели нормы и патологии (то есть «референтные значения»). Это нужно учитывать при оценке результатов каждого конкретного исследования. Некорректно интерпретировать результаты одной лаборатории по «референтным значениям» другой лаборатории. Также некорректно сравнивать результаты разных лабораторий между собой.

При постановке реакций ИФА имеет значение и такое понятие как авидность антител.
Авидность антител – это прочность связи антитела с антигеном и то количество антигена, находящегося во взаимосвязи с иммноглобулинами (антителами). Авидность имеет большое значение при оценке предполагаемого срока инфицирования, что чрезвычайно важно при диагностике первичного инфицирования у беременных.

Основа теста на авидность антител состоит из обработки иммунного комплекса (антиген-антитело) раствором мочевины с целью разрушения белка. Высокоавидные связи остаются целыми, а низкоавидные разрушаются. Результат выдается в виде индекса авидности, выражаемого в процентах (%).

Какие заболевания выявляются с помощью ИФА-диагностики?

1. Инфекционные заболевания
1.1 Вирусные гепатиты А (IgM, G), В антигены -HBsAg, HBeAg, антитела - IgM HBcorAg, Ig суммарные HBcorAg, IgG HBeAg), С (антитела Ig M, G HCV), D (IgM, G), E (Ig M, G) и другие.
1.2 ВИЧ-инфекция (IgG)
1.3 Цитомегаловирусная инфекция (антитела IgM, G)
1.4 Эпштейн-Барр инфекция или мононклеоз (антитела IgM, G к EA, VCA, NA белкам вируса)
1.5 Герпетические инфекции (антитела IgM, G)
1.6 Токсоплазмоз (антитела IgM, G)
1.7 Краснуха (IgM, G)
1.8 Корь (IgM, G), Бруцеллез (IgM, G), Псевдотуберкулез (IgM, G), Салмонеллез (IgM, G), Шигеллез или дизентерия (IgM, G), Аспергиллез (IgM, G), Клещевой энцефалит, Боррелиоз и многие другие.
1.9 Паразитозы (лямблиоз, токсокароз, трихинеллез, описторхоз, эхинококкоз, альвеококкоз и другие), при которых выявляются IgG
1.10 ЗППП (заболевания, передающиеся половым путем) – Микоплазмоз (IgM, G), Уреаплазмоз (IgM, G), Хламидиоз (IgA, M, G), Сифилис (IgG)
1.11 Хеликобактерная инфекция (IgG)

2. Маркеры аутоиммунных заболеваний и показатели иммунитета человека (общий IgE, общий IgG, общий IgA, общий IgM, общий IgD, секреторный IgA, IgG 2, IgG4, ЦИК-циркулирующие иммунные комплексы, IgA и IgG к глиадину и другие)

3. Онкологичсекие маркеры (ФНО – фактор некроза опухоли, РЭА – раково-эмбриональный антиген, ПСА – простатспецифический антиген, ХГ – хорионический гонадотропин, СА 125, альвеомуцин и многие другие)

4. Репродуктивные нарушения (эстрадиол, прогестерон, пролактин, тестостерон, АФП- альфафетопротеин, ФСГ – фолликулостимулирующий гормон и другие)

5. Заболевания щитовидной железы (свободные и связанные Т3, Т4, тиреоглобулин, тиреопероксидаза – ТПО, тиреотропный гормон - ТТГ).

Данный список представлен далеко не всеми заболеваниями, которые диагностируются с помощью иммуноферментного анализа.

Количественный ИФА-метод

Результат ИФА-диагностики (с помощью иммуноферментного анализатора) выдается в определенных единицах измерения:
- Оптическая плотность (ОП) пробы – концентрация специфических антител в единице объема. Чем выше ОП пробы, тем выше концентрация антител. В некоторых результатах говорится о коэффициенте позитивности (КП) – это тоже оптическая плотность образца.
- Единицы концентрации антител (нанограмм/ миллилитр или нг/мл).
- В виде титров сывороток: 1:20, 1:40, 1:100, 1:200, 1:400, 1:800, 1:1200 и так далее. Диагностические титры (при которых ставится диагноз именно болезни, а не факт инфицирования) для разных болезней разные.
- В виде символов – «+», «-», «?» (+, ++, +++, ++++).
- В виде качественной оценки по заданному критерию (положительно или отрицательно).

Правильно оценить количество антител, вариант классового выявления иммуноглобулинов, а, следовательно, выставить стадию болезни и необходимость лечения может только врач.

Нельзя забывать, что для любой тест-системы разрабатываются свои «референтные значения» (варианты нормы), при превышении которых и диагностируется то или иное заболевание (варианты патологии). Для разных тест-систем «референтные значения» различные.

Корректное сравнивание результатов ИФА, взятых в динамике, возможно только в случае их изготовления в одной и той же лаборатории.